熒光分光光度計(jì)注意事項(xiàng)
熒光分光光度計(jì)注意事項(xiàng)
a. 請(qǐng)注意愛護(hù)液體比色皿,特別是測(cè)試有機(jī)樣品的同學(xué)請(qǐng)?jiān)跍y(cè)量完畢后用有機(jī)溶劑清洗,干燥后再放入盒子中,否則會(huì)造成比色皿表面嚴(yán)重污染,影響透光度。
b. 固體樣品池僅剩一個(gè),測(cè)試完畢請(qǐng)物歸原處。
測(cè)試完畢請(qǐng)注意登記,關(guān)閉儀器。
分子吸收、熒光、磷光輻射躍遷
躍遷——去活化過程
處于激發(fā)態(tài)分子不穩(wěn)定,通過輻射或非輻射躍遷等去活化過程返回至基態(tài) 。這些過程包括:
1)振動(dòng)弛豫
在液相或壓力足夠高的氣相中,處于激發(fā)態(tài)的分子因碰撞將能量以熱的形式傳遞給周圍的分子,從而從高振動(dòng)能層失活至低振動(dòng)能層的過程,稱為振動(dòng)弛豫。
2)內(nèi)轉(zhuǎn)換
對(duì)于具有相同多重度的分子,若較高電子能級(jí)的低振動(dòng)能層與較低電子能級(jí)的高振動(dòng)能層相重疊時(shí),則電子可在重疊的能層之間通過振動(dòng)耦合產(chǎn)生躍遷。
定性分析
任何熒光都具有兩種特征光譜:激發(fā)光譜與發(fā)射光譜。它們是熒光定性分析的基礎(chǔ)。
1)激發(fā)光譜
改變激發(fā)波長,測(cè)量在zui強(qiáng)熒光發(fā)射波長處的強(qiáng)度變化,以激發(fā)波長對(duì)熒光強(qiáng)度作圖可得到激發(fā)光譜。
激發(fā)光譜形狀與吸收光譜形狀*相似,經(jīng)校正后二者*相同!這是因?yàn)榉肿游展饽艿倪^程就是分子的激發(fā)過程。
激發(fā)光譜可用于鑒別熒光物質(zhì);在定量時(shí),用于選擇zui適宜的激發(fā)波長。
2)發(fā)射光譜
發(fā)射光譜即熒光光譜。一定波長和強(qiáng)度的激發(fā)波長輻照熒光物質(zhì),產(chǎn)生不同波長的強(qiáng)度的熒光,以熒光強(qiáng)度對(duì)其波長作圖可得熒光發(fā)射光譜。
由于不同物質(zhì)具不同的特征發(fā)射峰,因而使用熒光發(fā)射光譜可用于鑒別熒光物質(zhì)。
使用熒光光度計(jì)檢測(cè)熒光信號(hào)時(shí),比色皿使用完畢要用有機(jī)溶劑清洗干凈,防止比色皿污染導(dǎo)致測(cè)量值不準(zhǔn)確,此外實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,要將清洗好的比色皿干燥后再保存。